[摘要]该文对有毒药用植物黑龙骨的化学成分进行了研究。利用大孔吸附树脂、正相和反相硅胶柱和制备型HPLC等色谱技术从中分离得到9个化合物，分别为： 东莨菪内酯（1），trans-3，4，methylenedioxycinnamyl alcohol（2），syringaresinol（3），syringaresinol 4-O，β，D-glucopyranoside（4），6′-O-（E），feruloylsucrose（5），loliolide（6），4，hydroxy，3，methoxyl，benzaidehyde（7），Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol（8），Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol，20-O，β，D-canaropyranoside（9）。并运用质谱、核磁等波谱技术对分离得到的化合物进行了结构鉴定。化合物1，2，5～7为首次从该属植物中分离得到已知化合物。
[关键词]黑龙骨；杠柳属；化学成分
黑龙骨Periploca forrestii Schltr.，又名滇杠柳，为杠柳属植物，有小毒，具有舒筋活血、祛风除湿、清热解毒等功效，长期以来被作为苗族民间传统草药用于治疗风湿等疾病[1]。作者在对黑龙骨的化学成分研究过程中，分离得到了9个化合物，经鉴定分别为东莨菪内酯（1），trans-3，4，methylenedioxycinnamyl alcohol（2），syringaresinol（3），syringaresinol 4-O，β，D-glucopyranoside（4），6′-O-（E），feruloylsucrose（5），loliolide（6），4，hydroxy，3，methoxyl，benzaidehyde（7），Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol（8），Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol，20-O，β，D-canaropyranoside（9）。其中化合物1，2，5～7均为首次从该属植物中分离得到已知化合物。
1 材料
Mercury，400，Inova 500M及SX，600型核磁共振仪；Agilent 1100 Series LC，MSD，Trap，SL型质谱仪；液相色谱仪，Shimadazu LC，6AD，SPD，6A紫外检测器；YMC，Pack ODS，A制备型反相色谱柱（20 mm×250 mm，10 μm）；硅胶（160～200，200～300目），青岛海洋化工厂生产；大孔树脂，D101型，天津南开大学化工厂；反相硅胶，Rp，C18（40～75 μm），日本Fuji Silysia 公司生产。
黑龙骨药材于2005年采自中国广西，经广西中医学院韦松基教授鉴定为黑龙骨P. forrestii，标本现存于中国医学科学院药物研究所植物标本室，标本号ID，s，2360。
2 提取与分离
取干燥生药黑龙骨全株10 kg，粉碎，用95%乙醇加热提取3次，每次2 h，提取液减压浓缩得到流浸膏。将其悬浮于水中，用石油醚萃取。减压浓缩，得到石油醚萃取物122 g。水层部分经过滤，滤液上D101大孔吸附树脂，依次以水，30%，60%，95%乙醇洗脱，分别得到W1（110 g），W2（70 g），W3和W4部位，经TLC及HPLC检测60%乙醇（W3）和95%乙醇（W4）洗脱部位成分相似合并为W3（30 g）。取W3部位27 g，经硅胶柱G（200～300目）柱色谱，以氯仿，甲醇（15∶1，10∶1，5∶1，1∶1，0∶100）进行梯度洗脱，得到16个组分，经TLC检识合并，得到9个组分（Fr. 1～Fr. 9）。组分Fr. 1经硅胶柱和制备型HPLC分离得到化合物1（18 mg），2（17 mg），3（29 mg）；Fr.2经分离得到化合物6（11 mg），7（11 mg）；Fr.3经分离得到化合物8（11 mg）；Fr.5经分离得到化合物4（113 mg），9（24 mg）；Fr.9经分离得到化合物5（36 mg）。
3 结构鉴定
化合物1 白色无定形粉末，紫外光下显蓝色荧光。1H，NMR（C5D5N，600 MHz） δ：3.75（3H，s，6，OCH3），6.30（1H，d，J=9.6 Hz，H，3），7.03（1H，s，H，8），7.11（1H，s，H，5），7.67（1H，d，J=9.6 Hz，H，4），4.01（1H，s，7，OH）；13C，NMR（C5D5N，150 MHz）δ：161.5（C，2），112.6（C，3），144.1（C，4），109.5（C，5），146.3（C，6），153.1（C，7），104.2（C，8），151.1（C，9），111.1（C，10），56.2（6，OCH3）。以上数据与文献[2]对照一致，鉴定化合物1为东莨菪内酯。
化合物2 白色无定形粉末。1H，NMR（C5D5N，600 MHz） δ：7.18（1H，s，H，2），6.83（1H，d，J=7.8 Hz，H，5），6.92（1H，d，J=7.8 Hz，H，6），6.84（1H，d，J=16.2 Hz，H，7），6.52（1H，dt，J=16.2，4.2 Hz，H，8），5.93（2H，s，，OCH2O，），4.53（2H，d，J=4.2 Hz，H，9）；13C，NMR（C5D5N，150 MHz） δ：132.5（C，1），106.2（C，2），148.7（C，3），147.5（C，4），108.7（C，5），121.3（C，6），129.2（C，7），129.9（C，8），62.9（C，9），101.6（，OCH2O，）。以上数据与文献[3]对照一致，鉴定化合物2为trans-3，4，methylenedioxycinnamyl alcohol。
化合物3 白色无定形粉末。1H，NMR（DMSO-d2，500 MHz） δ：3.74（12H，s，3，5，3′，5′，OCH3 ），4.60（2H，d，J=3.0 Hz，H，7，7′），4.15（2H，dd，J=15.0，8.0 Hz，H，9a，9′a），3.81（2H，dd，J= 15.0，8.0 Hz，H，9b，9′b），3.03（2H，m，H，8，8′），6.59（4H，s，H，2，2′，6，6′）。以上数据与文献[4]对照，鉴定化合物3为syringaresinol。
化合物4 白色无定形粉末。1H，NMR（CD3OD，500 MHz） δ：3.80（6H，s，，OCH3×2），3.78（6H，s，，OCH3×2），4.71（1H，d，J=4.0 Hz，H，7′），4.66（1H，d，J=3.5 Hz，H，7），4.22（1H，dd，J=15.5，8.5 Hz，H，9a），3.84（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H，9b），4.22（1H，dd，J=15.5，8.5 Hz，H，9′a），3.86（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H，9′b），3.07（1H，m，H，8），3.13（1H，m，H，8′），6.65（2H，s，H，2′，6′），6.60（2H，s，H，2，6），4.97（1H，d，J=7.8 Hz，H，1″），3.70（1H，dd，J=12.0，1.5 Hz，H，4″），3.61（1H，dd，J=12.0，5.0 Hz，H，3″），3.47（1H，dd，J=7.5，1.5 Hz，H，5″），3.35（2H，dd，J=7.5，1.5 Hz，H，6″），3.25（1H，m，H，2″）；13C，NMR（CD3OD，125 MHz）δ：154.4（C，3′，5′），149.4（C，3，5），139.5（C，1′），136.2（C，4），135.6（C，4′），133.1（C，1），104.8（C，2′，6′），104.5（C，2，6），87.6（C，7），87.2（C，7′），72.9（C，9′），72.8（C，9），55.7（C，8），55.5（C，8′），105.3（C，1″），78.3（C，5″），77.8（C，3″），75.7（C，2″），71.3（C，4″），62.6（C，6″），57.1（，OCH3×2），56.8（，OCH3×2）。以上数据与文献[4]对照一致，鉴定化合物4为syringaresinol 4-O，β，D-glucopyranoside。
化合物5 白色无定形粉末。1H，NMR（DMSO-d6，400 MHz） δ：7.52（1H，d，J=15.5 Hz，H，7），7.00（2H，s，H，2，6），6.47（1H，d，J=15.5 Hz，H，8），5.21（1H，d，J=3.6 Hz，H，1′），3.25（1H，dd，J=9.5，4.5 Hz，H，1′），3.82（1H，m，H，3′），3.11（1H，t，J=9.5 Hz，H，4′），4.00（1H，m，H，5′），4.13（1H，d，J=6.0 Hz，H，6′a），4.29（1H，d，J=12.0 Hz，H，6′b），3.60（2H，d，J=2.0 Hz，H，1″），3.88（1H，d，J=8.0 Hz，H，3″），3.82（1H，t，J=7.5 Hz，H，4″），3.60（1H，m，H，5″），3.54（1H，m，H，6″a），3.52（1H，m，H，6″b）；13C，NMR（DMSO，125MHz）δ：166.7（C〖CDS2mm〗O），148.2（C，3，C，5），145.4（C，7），139.6（C，4），123.4（C，1），115.6（C，8），106.3（C，2，6），103.8（C，2′′），91.3（C，1′），82.6（C，5″），76.9（C，3″），74.5（C，4″），72.8（C，3′），71.5（C，2′），70.2（C，5′），70.0（C，4′），63.8（C，6′），62.6（C，6″），62.4（C，1″），56.0（，OCH3×2）。以上数据与文献[5]对照一致，鉴定化合物5为6-O-（E），feruloylsucrose。
化合物6 白色无定形粉末。1H，NMR（C5D5N，500 MHz） δ：5.82（1H，s，H，7），4.34（1H，br s，H，3），3.59（1H，s，3，OH），2.57（1H，br d，J=13 Hz，H，4a），2.01（1H，br d，J=14 Hz，H，2a），1.90（3H，s，H，11），1.73（1H，br d，J=13 Hz，H，4b），1.49（3H，s，H，9），1.38（1H，br d，J=14 Hz，H，2b），1.11（3H，s，H，10）；13C，NMR（C5D5N，125 MHz） δ：36.2（C，1），47.7（C，2），65.9（C，3），46.4（C，4），87.0（C，5），182.9（C，6），113.1（C，7），171.8（C，8），26.6（C，9），30.7（C，10），27.3（C，11）。以上数据与文献[6]对照一致，鉴定化合物6为loliolide。
化合物7 无色油状物。1H，NMR（C5D5N，600 MHz） δ：9.99（1H，s，1，CHO），7.56（1H，br s，H，2），7.55（1H，d，J=7.8 Hz，H，6），7.24（1H，J=7.8 Hz，H，5），3.72（3H，s，3，OCH3）；13C，NMR（C5D5N，150 MHz）δ：189.5（，CHO），128.4（C，1），109.6（C，2），148.1（C，3），153.8（C，4），115.3（C，5），126.0（C，6），54.5（，OCH3）。以上数据与文献[7]对照一致，鉴定化合物7为4，hydroxy，3，methoxyl，benzaidehyde。
化合物8 白色无定形粉末。1H，NMR（C5D5N，400 MHz） δ：5.38（1H，d，J=4.8 Hz，H，6），4.13（1H，q，J=6 Hz，H，20），1.51（3H，d，J=6 Hz，H，21），1.07（3H，s，H，19），0.80（3H，s，H，18）；13C，NMR（C5D5N，100 MHz） δ：37.8（C，1），32.2（C，2），71.3（C，3），43.5（C，4），141.9（C，5），121.3（C，6），32.6（C，7），32.4（C，8），50.4（C，9），36.9（C，10），21.0（C，11），38.5（C，12），46.0（C，13），51.9（C，14），24.0（C，15），31.7（C，16），85.7（C，17），14.3（C，18），19.6（C，19），71.8（C，20），19.5（C，21）。以上数据与文献[8]对照，鉴定化合物8为Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol。
化合物9 白色无定形粉末。13C，NMR（C5D5N，100 MHz） δ：37.8（C，1），32.7（C，2），73.0（C，3），43.5（C，4），142.0（C，5），121.3（C，6），32.4（C，7），32.3（C，8），50.4（C，9），36.9（C，10），21.1（C，11），31.6（C，12），46.0（C，13），51.5（C，14），24.0（C，15），36.9（C，16），85.4（C，17），14.6（C，18），19.7（C，19），82.8（C，20），18.9（C，21），102.6（C，1′），41.2（C，2′），71.3（C，3′），78.6（C，4′），72.1（C，5′），18.3（C，6′）。以上数据与文献[9]对照，鉴定化合物9为Δ5，pregnene，3β，17α，20α-triol，20-O，β，D-canaropyranoside。
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Chemical constituents of Periploca forrestii
LI Yong， LIU Yun，bao， YU Shi，shan*
（State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines， Institute of Materia Medica，
Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College， Beijing 100050， China）
[Abstract] The chemical constituents of Periploca forrestii were studied by means of macroporous resin， silica gel， ODS column chromatography and PHPLC. Nine compounds were isolated from this plant. By using ESI，MS and NMR， the structures of the nine compounds were determined as scopoletin（1）， trans-3， 4，methylenedioxycinnamyl alcohol（2）， syringaresinol（3）， syringaresinol 4-O，β，D-glucopyranoside（4）， 6′-O-（E），feruloylsucrose（5）， loliolide（6）， 4，hydroxy，3，methoxyl，benzaidehyde（7）， Δ5，pregnene，3β， 17α， 20α-triol（8） and Δ5，pregnene，3β， 17α， 20α-triol，20-O，β，D-canaropyranoside（9）， respectively. Compounds 1， 2 and 5，7 are isolated from Periplocagenus for the first time.
[Key words] Periploca forrestii； Periploca genus； chemical constituents
doi：10.4268/cjcmm20131016
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