化学指纹图谱法及DNA条形码分子鉴定技术对鸡血藤饮片煮散质,量体系进行探索

报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取鸡血藤饮片200g作为研究对象，将鸡血藤原饮片作为对照组（100g），将余下鸡血藤饮片粉碎后过筛得到鸡血藤煮散饮片，将其作为观察组（100g）。

1.2方法

化学指纹图谱法：应用高效液相色谱仪系统（美国Waters2695型），选择Empower色谱工作站、W2998 DAD 检测器，建立色谱条件，制备表儿茶素（中国药品生物制品鉴定所，生产批号：110878-200102，含量：≥98%）对照品溶液，将其置于4℃冰箱中，保存备用，制备鸡血藤饮片（康美药业有限公司，生产批号：160301031）供试品溶液;DNA条形码分子鉴定技术取对照组与观察组饮片样本，应用液氮磨碎，并应用植物DNA提取试剂盒提取基因组总DNA，ITS2序列扩增应用正向引物、反向引物进行扩增，PCR模板DNA为2.0μL，反应体系为25μL，PCR扩增产物应用1.2%琼脂糖凝胶电泳进行检测，并应用PCR 仪（美国Applied Biosystems公司，型号：2720Thermal Cycler）双向测序PCR产物。鸡血藤饮片，鸡血藤煮散饮片与鸡血藤原饮片采用标准汤剂煎煮法进行提取，分别加水浸泡、煮沸、过滤，再加水煎煮、过滤，减压旋蒸，蒸干，计算出膏率。

1.3观察指标

①对比两组患者表儿茶素RSD、出膏率、表儿茶素含量、指纹图谱相似度以及相对峰面积。

1.4统计学处理

采用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析，正态计量数据用“”表示，组间比较采用t检验，样本率的比较采用χ2检验;以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

观察组表儿茶素RSD显著低于对照组;观察组出膏率、表儿茶素含量、指纹图谱相似度以及相对峰面积显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。具体见表1。

3 讨论

鸡血藤饮片煮散通过粉碎鸡血藤，使其成为一定的粒度，再应用水与之共煎，过滤沉渣，取上述汁，制成煮散，来进一步提高鸡血藤药材煎煮效率，节约鸡血藤用量，但鸡血藤饮片煮散过程中由于需要粉碎，导致鸡血藤药材形态遭到破坏，使临床上无法对该药物进行鉴别，故提供精准的鸡血藤识别与检测，提高临床用药疗效稳定性尤为重要，为探究鸡血藤饮片煮散质量体系应用化学指纹图谱法及DNA条形码分子鉴定技术探索情况，特做此研究分析[3]。

本研究表明，观察组表儿茶素RSD显著低于对照组;观察组出膏率、表儿茶素含量、指纹图谱相似度以及相对峰面积显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结果显示表与鸡血藤原饮片相比，鸡血藤饮片煮散的儿茶素RSD值明显降低，指纹图谱相似度显著升高，说明后者质量均一性较高，同时出膏率显著升高，表明鸡血藤饮片煮散可有效提高该药材有效成分的煎出率。与鸡血藤原饮片比较，鸡血藤饮片煮散质量体系应用标准化、规范化工艺，微小化、均匀化处理鸡血藤饮片的形状、规格，使其呈颗粒型，高效的分装、调剂、煎煮，药液过滤速度适度，使鸡血藤饮片质量更加稳定化，澄清度尚可，有效提高临床鸡血藤用药的稳定。与鸡血藤原饮片指纹图谱相比，鸡血藤饮片煮散相对峰面积有所增高，指纹图谱相似度更佳，证实应用化学指纹图谱法及DNA条形码分子鉴定技术可保证鸡血藤饮片煮散质量体系的质量，解决了辨药之难的问题，提供了饮片煮散的鉴定、检测的可靠技术，便于鸡血藤饮片煮散推广、应用。此外，与鸡血藤原饮片比较，鸡血藤饮片煮散可在保证疗效的同时，还可有效降低鸡血藤药物用量，提高鸡血藤资源的合理利用率，并提高甾体、黄酮类等鸡血藤药效物质的溶出，保证药物质量的稳定性。

综上所述，对于鸡血藤饮片煮散质量体系来说，应用化学指纹图谱法及DNA条形码分子鉴定技术具有较高的临床应用价值，可实现饮片的质量均一化、标准化工艺制备、自动化生产，为中医临床疗效提供可靠保障。

参考文献：

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[J].北京﹕中国医药科技出版社，2015：194.

[2] 舒顺利，应军，刘军民，等. 鸡血藤化学成分研究. 中药新药与临床药理，2012，23（2）：184-186.

[3] 陈士林，黄志海，丘小惠，等. 中药精准煮散饮片[J].世界科学技术中医药现代化，2016，18（9）：1430-1440.

推荐访问： 鸡血藤 饮片 条形码 图谱 指纹