Mx^u^㞻MuV"http://www.gzzcxlzx.com/t/cailiao/" target="_blank" class="keylink">材料与方法
1.1试验材料
1.1.1试验用鱼苏氏圆腹（Pangasius sutchi）由广西水产引育种中心提供。驯养7 d后选择健康、状态佳的鱼苗900尾，初始体质量约（1.45±0.08） g/尾，随机分成5组，每组设3个重复，每个重复60尾，将每个重复的鱼放养于1个水泥池（规格为1.52 m×1.00 m×1.00 m）中。
1.1.2饲料在基础饲料中添加不同比例的大豆磷脂（磷脂含量75%），配制成5组试验饲料，各组饲料组成、营养组成分别见表1、表2，各组磷脂水平分别为0%（PL0组）、1%（PL1组）、2%（PL2组）、3%（PL3组）、4%（PL4组）。
1.2饲养管理
饲养周期为56 d，各组使用相应的饲粮。每天9：00、17：00 投喂，投喂量一般为鱼体质量的3%，以每次投食在1 h内吃完为宜。饲养期间于每日清晨投喂前用虹吸法吸出饲料残渣、粪便，测定水温、pH值、溶解氧含量、氨态氮含量，观察记录各池鱼体活动及采食情况。
1.3测定指标及方法
1.3.1血清生化指标的测定饲养试验结束后，每个重复取10尾鱼，尾静脉抽血，4 000 r/min离心10 min，取上清，使用美国迈瑞BS-300全自动生化分析仪测定相关血清生化指标。采用紫外-苹果酸脱氢酶法测定谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）活性、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性；用氧化酶法测定甘油三酯（triglyceride，TG）含量；用CHOD-PAP法测定胆固醇（cholesterol，CHOL）含量；用直接选择抑制法测定高密度脂蛋白（high density lipoprotein cholesterol，HDLC）含量、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDLC）含量；用连续监测法测定淀粉酶（amylase，AMY）活性；用乳酸-丙酮酸法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性；用酶显色法测定磷脂（phospholipid，PL）含量。
1.3.2肌肉磷脂的测定取2 g左右的肌肉样品，加入Folch液（三氯甲烷 ∶甲醇=2 ∶1）5 mL，研磨组织样；随后转到圆底烧瓶中，加15 mL Folch液，回流2 h；过滤液体，装入25 mL容量瓶定容。从容量瓶中取10 mL溶液，用氮气吹干，称总脂质量。而后采用溶剂法（即液-液分离法）将总脂分离为极性脂（主要是磷脂）、中性脂，2个液相分别为石油醚（90 ～120 ℃，上层）、95%的含水甲醇（下层）。具体步骤：（1）制备饱和的上述2个液相，按1 ∶1比例等体积加至总脂中，充分振荡后静置分层，移去下层甲醇溶液；再用等量的甲醇重复前面操作2次，将极性脂、中性脂彻底分离。在甲醇中的为极性脂（即磷脂），在石油醚层中的为中性脂。将含极性脂的甲醇溶液用氮气吹干并准确称质量，计算肌肉磷脂含量：
肌肉磷脂含量=磷脂质量肌肉鲜样质量×100%。
以上各测定指标中用到的各种化学试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
1.4数据处理与分析
数据均以“平均值±标准误差”表示。用SPSS 11.5软件对所有数据进行统计分析，结合Duncan’s多重比较法，显著水平为0.05。
2结果与分析
2.1饲料磷脂水平对苏氏圆腹血清生化指标的影响
由表3可知，各组间血清磷脂含量差异不明显；PL4组的胆固醇含量最低，为（5.53±0.23）mmol/L；甘油三酯、高密度脂蛋白含量基本随着饲料磷脂水平的提高而降低；PL4组的低密度脂蛋白含量最低，但与其他4组差异不明显。
由表3还可以看出，PL4组的谷草转氨酶、乳酸脱氢酶活性最低，分别为（438.90±3.00）、（748.10±52.50） U/L，与其他4组差异显著（P<0.05）。淀粉酶活性以PL2组的最高，与其他4组差异显著（P<0.05），对照组最低。
2.2饲料磷脂水平对苏氏圆腹肌肉磷脂含量的影响
由表4可见，苏氏圆腹肌肉磷脂含量随饲料磷脂水平的升高而升高，PL4组的肌肉磷脂含量最高，与PL3组没有显著差异，分别比PL2、PL1、PL0组高17.74%、32.73%、40.38%（P<0.05）。
表4饲料磷脂对苏氏圆腹肌肉磷脂含量的影响
组别磷脂含量（%）PL01.04±0.09cPL11.10±0.09cPL21.24±0.08bPL31.43±0.06aPL41.46±0.10a
3结论与讨论
3.1饲料磷脂水平对苏氏圆腹血清生化指标的影响
一般认为，临床血清生化指标能有效且灵敏地反映出鱼类机体的生理病理变化状况[12-13]。有研究表明，饲料磷脂会降低血液中的胆固醇、甘油三酯的浓度[14]。在本试验中，饲料中添加磷脂，苏氏圆腹血液中的胆固醇、甘油三酯含量均有不同程度的下降，其中对胆固醇的影响最为明显，这说明饲料中添加一定量的磷脂能有效阻止胆固醇在血管内壁沉积，促进脂类的代谢。对于胆固醇含量的降低，可能是因为饲料中添加磷脂降低HDL、LDL的含量，而HDL、LDL又是胆固醇的主要载体，从而最终导致胆固醇含量的降低。
谷草转氨酶和谷丙转氨酶是氨基酸代谢过程中的重要酶类。ALT催化丙酮酸、谷氨酸之间的氨基转运；AST催化草酰乙酸和谷氨酸之间的氨基转换。这2种酶中，ALT更能专一反映肝脏细胞的损伤性，AST的反映灵敏度更高[13]。乳酸脱氢酶作为糖酵解过程中的重要酶，主要催化乳酸转化为丙酮酸，它存在于机体内所有组织细胞的胞质中。如果肝细胞损伤，AST、LDH就会从胞质中逸出进入血液，从而导致血浆中的AST、LDH含量升高[13]。本试验发现，随着饲料中磷脂水平添加量增加，AST、LDH含量大致降低；当饲料磷脂水平达到4%时，AST、LDH含量显著低于其他4组，这说明饲料中添加一定量的磷脂可有效缓解鱼体肝脏细胞的损伤程度。
淀粉酶主要催化糖原、淀粉的分解，提高鱼类利用碳水化合物的能力，并通过影响血糖水平的方式最终影响脂肪的代谢[15]。本试验中，对照组的AMY活性最低，间接说明了该组动员、转运脂肪的能力最弱。
3.2饲料磷脂水平对苏氏圆腹肌肉磷脂含量的影响
赵娜用不同磷脂水平饵料饲喂黄颡鱼仔稚鱼，发现14日龄的黄颡鱼体磷脂含量随着饵料中磷脂水平的升高而升高[16]。本试验结果与赵娜的报道[16]类似，随着饲料磷脂水平的升高，苏氏圆腹幼鱼肌肉的磷脂含量显著升高，这表明饲料中添加磷脂能够使幼鱼体内肌肉中贮存的磷脂量相应增加，以满足鱼体生长需要，这也与笔者之前做过的饲料磷脂对苏氏圆腹生长影响的试验结果相吻合。由于磷脂是香味的重要前体物质，肌肉磷脂的含量也会影响肉的品质风味[17]，根据本试验结果，在饲料中添加磷脂有助于提高苏氏圆腹肉的品质风味。
参考文献：
[1]Webster C D，Lim C. Nutrient requirements and feeding of finfish for aquaculture[M]. New York：CAB International，2002.
[2]Abbas K A，Sapuan S M，Mokhtar A S. Shelf life assessment of Malaysian Pangasius sutchi during cold storage[J]. Sadhana，2006，31（5）：635-643.
[3]Ranganna T S. Pangasius sutchi culture is commercially viable[N]. In the Hindu，2010-06-25.
[4]ZainuddinM J，Mokeginta I，Affandi R，et al. The optimum dietary level of phosphorus for catfish Pangasius sutchi fowler fingerling[J]. HAYATI Journal of Biosciences，2000，7（2）：133-137.
[5]朱永安，张婧一，郑玉珍，等. 淡水鲨鱼人工繁殖技术研究[J]. 内陆水产，2006（10）：36-37.
[6]陈秀珠. 水晶巴丁鱼控温人工繁育试验[J]. 科学养鱼，2004（10）：8.
[7]丁石春，洪正明，刘建光.淡水黑鲨池塘主养试验[J]. 当代水产，2005（1）：24.
[8]何顺昌，李惠忠. 淡水蓝鲨养殖技术[J]. 云南农业，2004（9）：19.
[9]朱银安. 淡水鲨鱼池塘养殖试验[J]. 科学养鱼，2006（5）：25.
[10]张茜，尹静. 淡水鲨鱼水泥池养殖技术[J]. 水产养殖，2006，27（2）：20-21.
[11]罗建华. 水晶巴丁鱼的工厂化健康养殖试验[J]. 北京水产，2005（5）：32-35.
[12]International A. Official methods of analysis of AOAC international[Z]. 1995.
[13]Shahsavani D，Mohri M，Kanani H G. Determination of normal values of some blood serum enzymes in Acipenser stellatus Pallas[J]. Fish Physiology and Biochemistry，2010，36（1）：39-43.
[14]Koven W M，Kolkovski S，Tandler A. The effect of dietary lecithin and lipase，as a function of age，on n-9 fatty acid incorporation in the tissue lipids of Sparus aurata larvae[J]. Fish Physiol Biochem，1993，10（5）：357-364.
[15]吴莉芳，秦贵信，赵元，等. 饲料中去皮豆粕替代鱼粉比例对草鱼消化酶活力的影响[J]. 中国畜牧杂志，2010，46（1）：23-27.
[16]赵娜. 饵料中不同磷脂水平对黄颡鱼仔稚鱼生长发育的影响[D]. 武汉：华中农业大学，2006.
[17]陈国宏，陈宽维，王克华，等. 中国部分地方鸡种血浆、肌肉磷脂含量比较研究[J]. 西北农业学报，1998，7（3）：11-14.丁淑燕，严维辉，郝忱，等. 兴国红鲤精液超低温冷冻保存及效果分析[J]. 江苏农业科学，2016，44（2）：277-279.
推荐访问： 磷脂 血清 生化 饲料 肌肉
